DNA的一级结构，就是指4种脱氧核苷酸的链接及排列顺序，表示了该DNA分子的化学构成。

DNA的一级结构是指DNA分子中的核苷酸单元，每个核苷酸由一个糖分子、一个碱基和一个脱氧核糖核苷酸组成。碱基包括腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）和胞嘧啶（C），它们按照一定的规则排列在一起，形成了DNA的序列。

DNA分子的化学构成是由这些核苷酸单元的排列顺序所决定的，不同的序列可以编码不同的遗传信息，控制生物体内各种生理功能的发挥。因此，DNA的一级结构是构建其二级、三级甚至更高级结构的基础。

核苷酸相互连接形成长的多核苷酸链。

两个核苷酸之间的连接通常是通过磷酸二酯键（phosphodiester bond），该键将一个核苷酸的磷酸基团与另一个核苷酸的脱氧核糖连接。由四种脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接而成的长链高分子多聚体为DNA分子的一级结构。

DNA分子中第一个核苷酸的3'-羟基与第二个核苷酸的5'-磷酸基脱水形成3',5'-磷酸二酯键,第二个核苷酸的3'-羟基又与第三个核苷酸的磷酸基脱水形成3',5'-磷酸二酯键，依此类推，形成线性多聚体。DNA分子中第一个核苷酸的5'-磷酸与最末一个核苷酸的3'-羟基都未参与形成3',5'-磷酸二酯键，故分别称为5'-磷酸端(或5'-端)和3'羟基端(或3'-端)。