耐热DNA聚合酶在PCR技术中广泛应用，根据其特性可大致分为三类：

第一类是普通耐热DNA聚合酶，如Taq DNA聚合酶，源自yT1水生栖热菌，具有5'-3'外切酶活性，但无3'-5'外切酶活性，因此在合成过程中对单核苷酸错配没有校正功能。这一酶在合成中还能将PCR双链产物的每一条链3'加入单核苷酸尾，使得PCR产物具有3'突出的单A核苷酸尾。此外，当仅存在dTTP时，它可以将平端的质粒的3'端加入单T核苷酸尾，从而实现PCR产物的T-A克隆法。Tth DNA聚合酶，来自Thermus thermophilus HB8，具有非模板依赖性活性，在高温及MnCl2条件下能有效逆转录RNA；添加Mg2+后，聚合活性显著提升，可实现cDNA合成与扩增。

第二类是高保真DNA聚合酶，如pfu DNA聚合酶和Vent DNA聚合酶。pfu DNA聚合酶来自Pyrococcus furiosis，无5'-3'外切酶活性，但具有3'-5'外切酶活性，用于校正PCR扩增过程中产生的错误，使产物的碱基错配率极低。Vent DNA聚合酶来自Litoralis栖热球菌，同样无5'-3'外切酶活性，但具有3'-5'外切酶活性，可去除错配的碱基，具备校对功能。

第三类是专门应用于DNA序列测定的耐热DNA聚合酶，如Promega公司的测序级TaqDNA聚合酶，通过去除5'-3'外切酶活性，确保测序结果的高度准确性，能产生强度均一的测序条带，背景清晰。Bca Best DNA聚合酶来自Bacillus Caldotenax YT-G菌株，其5'-3'外切酶活性缺失，具有卓越的伸长性能，能抑制DNA二级结构形成，从而获得均一的DNA测序带。Sac DNA聚合酶，来源于酸热浴流化裂片菌，无3'-5'外切酶活性，适用于DNA测序，但测序反应中ddNTP/dNTP的比率需较高。

扩展资料

DNA聚合酶（DNA polymerase）是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。