请设计一个完整的实验方案,如何获得一株可利用苯作为碳源和能源的微生物。
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2025-01-03
【答案】:(1)制备培养基:一种以苯为惟一碳源并制备平板为①,另一种不含任何碳源制备平板为对照②;(2)从苯含量高的环境中采集样品(土样或水样);(3)适当稀释样品(十倍稀释法),涂布平板①;(4)将涂布的平板①至于适当恒温条件下培养,观察是否有菌落产生;(5)将平板①上的
【答案】:(1)制备培养基:一种以苯为惟一碳源并制备平板为①,另一种不含任何碳源制备平板为对照②;(2)从苯含量高的环境中采集样品(土样或水样);(3)适当稀释样品(十倍稀释法),涂布平板①;(4)将涂布的平板①至于适当恒温条件下培养,观察是否有菌落产生;(5)将平板①上的菌落编号并分别转接至平板②,置于相同的恒温下培养能在平板②上生长的是可利用空气中CO2的自养型微生物);(6)挑取在平板①上生长而不在平板②上的菌落,在新的平板①划线、培养、获得单菌落,即可初步确定为能利用苯作为碳源和能源的微生物;(7)将初步确定的目标菌株转接至以苯为惟一碳源的液体培养基中进行摇瓶发酵实验,再利用相应的化学分析方法定量分析该菌株分解利用苯的情况。(分离其他微生物如酚降解菌也可参照此法;另外也可采用梯度平板法进行分离纯化)
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