光面内质网在生物体内扮演着多样的角色，其功能涉及合成类固醇、脂类代谢、解毒作用以及离子贮存与调节等多个方面。

首先，合成类固醇激素的合成主要发生在分泌类固醇激素的细胞中。光面内质网膜上含有合成胆固醇所需的酶系，通过这一途径合成的胆固醇随后转变为类固醇激素。

其次，脂类代谢也是光面内质网的重要功能之一。小肠吸收细胞通过光面内质网酯化脂肪酸、甘油及甘油一酯，将其转化为甘油三酯。同样，在肝细胞中摄取的脂肪酸也是在光面内质网上被氧化还原酶分解，或者再度酯化。

光面内质网在解毒作用中也发挥着关键作用。肝细胞的光面内质网含有参与解毒作用的各种酶系，能够处理外来药物、有毒代谢产物及激素等，通过氧化、还原、水解或结合等处理，将其转化为无毒物质排出体外。

此外，光面内质网还承担着离子贮存与调节的重任。在横纹肌细胞中，光面内质网被称为肌浆网，其膜上有钙泵，能够将细胞质基质中的Ca2+泵入并贮存起来，从而导致肌细胞松弛。在特定因素作用下，贮存的Ca2+会释放出来，引发肌细胞收缩。而胃底腺壁细胞的光面内质网则具有氯泵，当分泌盐酸时会将CIˉ释放，参与盐酸的形成。