快速，条带细而清晰。双向纸层析的优点是快速，条带细而清晰。在纸层析、薄层层析或聚酰胺尼龙薄膜等层析时通过两次不同方向的流动相展开，以期获得样品的进一步分离的方法。一般是在第一次层析分离后，变换90方向用不同的溶剂系统进行第二次层析。