关于elisa问题

职业培训 培训职业 2024-12-16
1. 在进行ELISA实验时,大鼠血液的采集通常分为血清和血浆两种方式。血清是不加抗凝剂的血液分离物,而血浆则是加入抗凝剂的血液分离物。2. 血浆的采集量通常较血清多,因为血浆含有抗凝剂,有利于减少血液凝固。采集方法包括静脉采血和眼眦采血,两者均可行,但分离血清或血

1. 在进行ELISA实验时,大鼠血液的采集通常分为血清和血浆两种方式。血清是不加抗凝剂的血液分离物,而血浆则是加入抗凝剂的血液分离物。

2. 血浆的采集量通常较血清多,因为血浆含有抗凝剂,有利于减少血液凝固。采集方法包括静脉采血和眼眦采血,两者均可行,但分离血清或血浆时必须避免溶血。

3. ELISA试剂盒大多采用辣根过氧化物酶(HRP)标记,而红细胞中存在这种酶,溶血会导致假阳性结果。一般情况下,每1毫升血液可以分离出300至500微升的血清或血浆,而ELISA实验通常只需要100微升。

4. 促凝管应放置约半小时,EP管则需放置1小时左右,两者均可置于4℃或室温下。理论上,4℃条件下保存可能效果更佳。

5. 离心过程中,大鼠血液应以2500转/分钟的速度离心10分钟,小鼠血液则以1500转/分钟的速度离心10分钟。转速过高可能导致红细胞压积和破裂,进而引发溶血。

6. 离心的目的是为了更好地分离血清或血浆。如果静置后已经收集到了所需的血清或血浆量,则无需再离心。

7. 分离出的血清或血浆可以在-80℃下存放约3个月。具体的保存时间取决于测定指标的稳定性,例如某些易降解的指标可能需要添加捕获剂。

8. 以上步骤均为手动操作,且未得分,显得有些不公平。

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