wb实验全称叫免疫印迹实验。免疫印迹试验(westernblot，WB)是普遍用以很多传染性疾病确诊的实验方法，就HIV的病原学确诊来讲，它是优选的用于确定HIV抗原的确定实验方法，WB的检验结果经常被做为辨别别的检测方式好坏的金标准。

wb的实验步骤

制样:裂解缓冲液或者超声处理。(使用RIPA裂解液是需按照100:1加入蛋白酶抑制剂)。电泳:根据蛋白大小确定合适的PAGE胶浓度，推荐上样量为20-30ug总蛋白。转膜:湿转和半干转都可。但在待检测蛋白分子量较大或低内源水平湿转移方法更佳。洗膜:10min/次*3次。

封闭:含5%脱脂奶粉的TBST中封闭1h。洗膜:TBST中洗涤10min。孵育-抗:-抗应在含5%BSA或5%脱脂牛奶的TBST缓冲液中稀释，参考产品说明书选择合适的一-抗稀释比例。5%推荐使用脱脂奶粉的TBST缓冲液，背景相对较低。-抗4°C孵过夜更好。

洗膜:10min/次*3次。孵育二抗:建议在含5%脱脂牛奶TBST中稀释-抗参考生产商建议选择合适的二抗稀释比例。洗膜:10min/次*3次。检测:化学发光检测。