羊咩咩|流式分选的原理
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2024-12-07
流式分选技术的运作基于信号强度和细胞数量的二维分析,其中X轴代表信号强度,Y轴则反映了细胞的分布数量。在理想状态下,每个四滴液滴中就含有一个细胞,确保了分选的精确度。选择喷嘴的大小至关重要。一般建议喷嘴直径至少是细胞直径的3倍,以防止细胞阻碍液滴形成,例如,
流式分选技术的运作基于信号强度和细胞数量的二维分析,其中X轴代表信号强度,Y轴则反映了细胞的分布数量。在理想状态下,每个四滴液滴中就含有一个细胞,确保了分选的精确度。
选择喷嘴的大小至关重要。一般建议喷嘴直径至少是细胞直径的3倍,以防止细胞阻碍液滴形成,例如,对于直径为15微米的肿瘤细胞,推荐使用75微米的喷嘴;淋巴细胞较小,直径为9微米,适合使用45微米的喷嘴。以70微米喷嘴为例,当其工作频率设定为87千赫兹(87,000液滴每秒),理论上可以产生20,500个细胞事件(events/s)的上样速度,这是它的最大处理能力。
如果需要提高上样速度(>x),则需要适当稀释样本,降低浓度;反之,如果目标是浓缩样本(<x),则应提高上样速度以增加细胞检测数量。总的来说,流式分选的策略需要根据细胞特性和实验需求进行精细调整。
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