在配制外周血培养基时，水的质量至关重要。根据Waymouth标准，需要使用电阻达到200万欧姆的蒸馏水，实验室常见的双蒸水或三蒸水可满足要求。

培养基主要由水构成，实验室常用的是RPMI-1640粉末培养基，需以蒸馏水配制。调pH值至7.2～7.4，过高的pH（如超过7.6）或过低（远低于6.8）将影响细胞生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，需先通过0.22μm孔径滤膜灭菌处理。

血清在培养中扮演重要角色，通常使用小牛血清（或胎牛血清）。由于血清不能高压灭菌，需要在56℃水浴30分钟灭活补体，然后冷藏备用。血清浓度根据细胞类型和培养时间调整，一般10%～15%为宜。若需控制复杂成分，无血清培养基也是选择之一。

为了防止细菌污染，培养基中常加入抗菌素，如卡那霉素100单位/毫升、青霉素100单位/毫升和链霉素100微克/毫升，用量与组织细胞培养一致。

对于不能制备染色体的非增殖期细胞，如人外周血淋巴细胞，可通过加入植物血凝素（PHA）刺激其转化为淋巴母细胞，进入有丝分裂。实验显示，细胞分裂高峰期分别在培养后44-48小时和68-72小时。PHA含有粘多糖和蛋白质，粘多糖促进有丝分裂，蛋白质负责细胞凝集。激活细胞数随PHA浓度增加，但过高浓度可能导致细胞聚集，一般推荐使用4%浓度。

扩展资料

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。