药物转运体的探索之路：揭示代谢之谜</

在药物代谢的神秘世界中，膜蛋白犹如关键的闸门，分为两大类：吸收和外排。吸收转运体家族包括SLC、氨基酸转运体和寡肽转运体，它们如左旋多巴和伐昔洛韦这样的药物的载体，或是其影响者。外排转运体如ABC家族的P-gp、MRPs和BCRP，例如雌二醇，它们作为抑制剂，影响着药物的吸收、分布和排泄。

研究方法多样且精密，如体外细胞模型，Caco-2细胞凭借其与人体高度同源性，搭载了MDR1、MRP2和PEPT1等多种转运体，是药物吸收、机制研究和相互作用的理想平台。然而，Caco-2细胞可能对某些转运体的表达有所限制，而无转运体的细胞系则适用于快速评估药物吸收。Transwell模型则用于测定药物的跨膜转运，原代肝细胞，如保留完整转运体基因的模型，为代谢和转运研究提供了珍贵的资源。

游离肝细胞培养技术如OATP参与替米沙坦的吸收，通过重复实验减少干扰，展现出研究转运体功能的独特价值。与肝灌流和切片相比，原代细胞模型保有细胞结构完整性和代谢酶活性，但模拟整体功能还需进一步优化。脑微血管内皮细胞(BMECs)则用于研究血脑屏障(BBB)转运体，如普朗尼克嵌段共聚物对P-gp的影响。

在复杂模型中，如MDCK-OCT1-MATE1双转染细胞，可研究二甲双胍和MPP+的联合转运，而MDCK-MMC模型则探究转运体与CYP3A4协同作用对药物吸收的影响。这些模型虽价值高，但无法完全预测体内转运的复杂性。

膜模型的探索</

ATP酶测定法揭示底物与转运体的互动，但其局限性不容忽视。膜囊泡模型如BBMV法，模拟药物吸收过程，为早期筛选提供便利。甘氨酰肌氨酸的肠道转运由PEPT1介导，而肠细胞和基底膜囊泡研究则适用于转运机制的早期探究。

外翻转膜囊泡模型在外排转运体研究中发挥重要作用，通过测定转运体药物作用，帮助我们深入理解。多细胞制备囊泡时，需配备ATP再生系统和对照，外翻转模型在大分子药物研究中尤为有效。

药物与转运体直接作用的实验，用于QSAR分析，疏水性底物则需排阻技术降低干扰。肾切片模型则聚焦于分泌转运体的研究，但不适用于重吸收过程。

在体模型的实践应用</

鼠胆管结扎模型通过灌流和药物浓度测定，揭示吸收竞争的影响。在体肠灌流模型则提供生理条件下药物吸收的真实情况。脑灌流模型揭示药物进出脑的动态，评估BBB的完整性，而肝灌流模型则揭示了OATP、MRP和BCRP在药物转运中的角色。

基因敲除小鼠模型是研究转运体功能的理想工具，但需注意其可能带来的器官功能改变和基因表达的不确定性。小动物活体成像技术，如光学成像，如PET和光学，为药物代谢研究提供了新视角，尤其是对BCRP和P-gp的研究。

尽管存在基因敲除模型的限制和费用问题，但新技术的引入无疑将推动药物研究的精度和全面性。Acta Pharmaceutica Sinica 2014的研究成果，以及汇智和源提供的生物试剂和服务，为生物医学研究提供了强大的支持。