HE染色法是病理制片的常规染色技术，能清晰展示正常组织与病理组织的形态结构。该技术基于两种基本染色剂，苏木精和伊红，分别用于细胞核和细胞浆的染色。其原理包括细胞核的碱性染色与细胞浆的酸性染色，以及后续的分化和返蓝作用。在HE染色中，细胞核由苏木精染成蓝色，细胞浆由伊红染成红色。

实验原理包括：

1、苏木精染色原理：苏木精为碱性染料，能与DNA双螺旋结构中的碱基结合，因DNA双螺旋的外侧带负电荷而被染色。苏木精在碱性环境下呈蓝色，从而使得细胞核呈现蓝色。

2、伊红染色原理：伊红为酸性染料，能与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使得细胞浆被染成红色。伊红在水中解离为负离子，与胞浆蛋白质的正电荷结合。

3、分化作用：使用0.5%盐酸乙醇作为分化液，盐酸能破坏苏木精的醌型结构，促进组织与色素的分离，使染色剂脱去。这一步骤是HE染色的关键，确保细胞核与细胞浆染色的分明。

4、返蓝作用：在酸性条件下，苏木精染上的细胞核处于红色离子状态，而分化后需立即用0.2%氨水终止分化，使细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用。使用自来水进行冲洗也可实现返蓝作用，但所需时间较长。

实验材料与试剂包括苏木精染液、伊红染液、0.5%盐酸乙醇分化液、0.2%氨水等。

染色步骤与方法如下：

1、烤片：在60℃下烤片60分钟，以确保组织切片与载玻片紧密贴合。

2、切片脱蜡至水：采用特定顺序的脱蜡步骤，最终使用蒸馏水清洗。

3、染色：包括木精染色、蒸馏水清洗、盐酸乙醇分化、蒸馏水清洗、氨水返蓝、蒸馏水清洗、伊红染色和速洗。

染色结果：细胞核呈蓝色，细胞浆呈粉红色至桃红色，胶原纤维呈淡粉红色，红细胞呈橘红色。钙盐、细菌菌落则呈现蓝色或紫蓝色。

注意事项包括：

1、脱蜡应彻底，避免影响染色效果。

2、染色时间与染液的新旧程度有关，需根据实际情况调整。

3、伊红染液的pH值需在3.6-4.7之间，避免与胞核染色体等电点相冲突。

4、掌握好分化程度，及时终止分化，避免过度脱色。

5、封固用的中性树胶浓度应适宜，避免气泡产生。

6、脱蜡用二甲苯需定期更换，避免云雾现象。

7、苏木素染色时间根据组织的差异进行调整，通常为5-10分钟，必要时可延长。

8、苏木素液需勤过滤，颜色变化时需更换新液。

9、盐酸酒精分化需凭经验控制，直到组织着染适度。

10、分化后的切片需立即冲洗，防止残留盐酸酒精继续脱色。

11、伊红染色应控制在淡染状态，避免喧宾夺主。

12、组织切片的脱水、透明等步骤需彻底进行。

13、有脱落现象时，可使用0.5%稀火棉胶液防止。

在HE染色过程中，严格遵循上述步骤与注意事项，可以确保染色结果的高质量，为病理学研究提供清晰、准确的组织结构信息。